Pode ocorrer interações com medicamentos que inibem a ação da dihidrofolato redutase ou que interferem na absorção e armazenagem de folatos nos tecidos; corticóides (uso prolongado), analgésicos (uso prolongado), anticonvulsivantes do grupo hidantoína (o uso concomitante e em grandes quantidades pode diminuir os efeitos dos anticonvulsivantes do grupo hidantoína mediante antagonismo com seus efeitos sobre o SNC), contraceptivos orais (as necessidades de Ácido Fólico podem aumentar), antibióticos (podem interferir no método de ensaio utilizado para determinar as concentrações de Ácido Fólico no soro e em eritrócitos, produzindo resultados falsamente baixos). As sulfamidas ínibem a absorção do folato e as necessidades de Ácido Fólico podem aumentar em pacientes que recebem sulfasalazina.