Não foram realizados estudos sobre a ação do metilsulfato de neostigmina (princípio ativo do Prostigmine) na gravidez, seja em seres humanos seja em animais de experimentação. Portanto, deve-se observar o princípio médico de não se administrar medicamentos durante a gravidez e a lactantes, a não ser em casos de extrema necessidade e, mesmo assim, utilizando-se dose bem ajustada e sob observação médica.
Desconhece-se, até o momento, se Prostigmine é excretado pelo leite materno.